Стр. 23
Страницы: | Стр.1 | Стр.2 | Стр.3 | Стр.4 | Стр.5 | Стр.6 | Стр.7 | Стр.8 | Стр.9 | Стр.10 | Стр.11 | Стр.12 | Стр.13 | Стр.14 | Стр.15 | Стр.16 | Стр.17 | Стр.18 | Стр.19 | Стр.20 | Стр.21 | Стр.22 | Стр.23 | Стр.24 | Стр.25 | Стр.26 | Стр.27 | Стр.28 | Стр.29 | Стр.30 | Стр.31 | Стр.32 | Стр.33 | Стр.34 | Стр.35 | Стр.36 | Стр.37 | Стр.38 | Стр.39 | Стр.40 | Стр.41 | Стр.42 | Стр.43 | Стр.44 | Стр.45 | Стр.46 | Стр.47 | Стр.48 | Стр.49 | Стр.50 | Стр.51 |
¦ ¦ ¦ ¦культуры и окрашивают их по Цилю- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Нильсену (см. п. 8.17.17.1). Посевы ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инкубируют в термостате при 37 град.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦C в течение 4 недель, затем ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦учитывают результат. Пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обеззараживают автоклавированием ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.18.2. ¦к 7 резервным препаратам ¦исследование ¦Подготовительная работа: ¦врач- ¦ 26 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦приготовление сред, посев, ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦аналогично п. 8.17.17.3.1. Окраска +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦мазка по Цилю-Нильсену аналогично п.¦фельдшер- ¦ 23 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦8.17.17.1. Стерилизация пробирок и ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦резиновых пробок. Готовят среду ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Левенштейна-Йенсена, не содержащую ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦противотуберкулезные препараты (ПТП)¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(контроль) и набор сред, содержащих ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦химически чистые субстанции ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦резервных ПТП в определенных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦концентрациях (канамицин, этионамид,¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микобутин, амикацин, офлоксацин, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ПАСК, ломефоксацин) ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Проведение исследования: суспензию ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микобактерий стандартизуют по ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦оптическому стандарту мутности, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦засевают в контрольную пробирку и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирки с ПТП (всего 8 пробирок). ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Параллельно готовят мазки из ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦культуры и окрашивают их по Цилю- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Нильсену (см. п. 8.17.17.1). Посевы ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инкубируют в термостате при 37 град.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦C в течение 4 недель, затем ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦учитывают результат. Пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обеззараживают автоклавированием ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.19 ¦микробиологические ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦исследования на туберкулез с¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦использованием ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦автоматизированных систем ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.19.1. ¦культуральное исследование ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.19.1.1¦при отсутствии микобактерий ¦исследование ¦Подготовка к исследованию: ¦врач- ¦ 10 ¦ - ¦
¦ ¦туберкулеза ¦ ¦стерилизация баночек для сбора ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мокроты и резиновых пробок. +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦Приготовление среды. Приготовление ¦фельдшер- ¦ 15 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦красителей. Проведение исследования:¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦приготовление раствора для обработки¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦проб. Обработка диагностического ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материала. Посев. Учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Микроскопическое исследование по ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Цилю-Нильсену (см. п. 8.17.17.1). ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Мазок высушивают на воздухе, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦просматривают под микроскопом с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦иммерсионной системой, проводят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦количественный учет результатов в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦100 полях зрения. Обеззараживание ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦автоклавированием ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.19.1.2¦при выделении микобактерий ¦исследование ¦Приготовление сред, посев аналогично¦врач- ¦ 16 ¦ - ¦
¦ ¦туберкулеза с изучением ¦ ¦п. 8.17.17.3.1 ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦морфологических свойств ¦ ¦При появлении флуоресценции в +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦пробирке с диагностическим ¦фельдшер- ¦ 20 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦материалом готовят мазок из ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирки, окрашивают его по Цилю- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Нильсену (см. п. 8.17.17.1), ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦просматривают под микроскопом с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦иммерсионной системой. Засевают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦суспензию микобактерий из пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦на чашку с кровяным агаром для ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контроля контаминации. Учет ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результатов Пробирки обеззараживают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦автоклавированием ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.19.1.3¦исследование с ¦исследование ¦Приготовление сред, посев аналогично¦врач- ¦ 53 ¦ - ¦
¦ ¦идентификацией до вида ¦ ¦п. 8.17.17.3.1 ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦приготовление и окраска мазка по +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦Цилю-Нильсену (см. п. 8.17.17.1). ¦фельдшер- ¦ 32 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦Засевают суспензию микобактерий в ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирку со средой Финна-II для ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦получения колоний микобактерий для ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦идентификации выделенных культур ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микобактерий. Проводят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦бактериологические и биохимические ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦тесты. Бактериологические тесты: ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦приготовление питательных сред ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(среды с пара-нитробензойной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кислотой, среды с ПАСК, среды с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦NaCl, простого агара). Проведение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦исследования: готовят суспензию ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микобактерий в физиологическом ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦растворе, засевают ее в пробирки со ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦средой Финна II (7 пробирок), с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ингибитором (пара-нитробензойная ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦кислота), ПАСК, NaCl, простым агаром¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(2 пробирки). Параллельно готовят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мазки из культуры и окрашивают их по¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Цилю-Нильсену. Посевы инкубируют в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостатах при температуре 22 град.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦C, 37 град. C, 45 град. C, 52 град. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦C в течении 3 недель. Пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦просматривают и оценивают рост ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микобактерий. Пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обеззараживают автоклавированием. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Биохимические тесты: определение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦каталазной активности и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦термостабильности каталазы; ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ниациновая проба; редукция нитратов.¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Учет результатов Пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обеззараживают автоклавированием ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.19.2 ¦определение чувствительности¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦микобактерий к ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦противотуберкулезным ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦препаратам методом пропорций¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.19.2.1¦к 4 основным препаратам ¦исследование ¦Окраска мазка по Цилю-Нильсену (см. ¦врач- ¦ 15 ¦ - ¦
¦ ¦(стрептомицин, изониазид, ¦ ¦п. 8.17.17.1). Подготовка к ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦рифамицин, этамбутол (SIRE))¦ ¦исследованию. Растворяют пиразинамид+------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦путем добавления 4 мл стерильной ¦фельдшер- ¦ 5 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦дистиллированной воды во флаконы со ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стрептомицином, изониазидом, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рифампицином, этамбутолом. Маркируют¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирки. Добавляют по 100 мкл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствора препаратов в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦соответствующие пробирки до ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦достижения концентраций препаратов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(мкг/л) стептомцин 1,0, изиниазид ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦0,1, рифампицин 1,0, этамбутол 5,0. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦В контрольную и опытные пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавляют по 800 мкл ростовой ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавки. Пробирку с суспензией ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микобактерий встряхивают на вортексе¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦для гомогенизации, оставляют на 5 - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦10 минут для осаждения крупных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦конгломератов. Готовят мазок из ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦осадка, окрашивают по Цилю-Нильсену,¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦просматривают под микроскопом с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦иммерсионной системой. Готовят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рабочее разведение суспензии 1:5 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Контролируют мутность суспензии с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦помощью нефелометра. Готовят рабочее¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦разведение суспензии 1:100 для ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦посева в контрольную пробирку, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавляя 0,1 мл суспензии в пробирку¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦с 10 мл стерильного физиологического¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствора. Посев (стерильной пипеткой¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вносят 0,5 мл разведения 1:100 в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контрольную пробирку, 0,5 мл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рабочего разведения в пробирки с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦препаратами). Пробирки перемешивают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦несколько раз (переворачиванием) и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦устанавливают в держатель MGIT. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Держатели с пробирками помещают в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ящики прибора MGIT в гнезда, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦указанные прибором, на срок до 21 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦дня, после чего регистрируют ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результат. Засевают 0,5 мл суспензии¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микобактерий из пробирки MGIT на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦чашку с кровяным агаром для контроля¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контаминации. Пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦обеззараживают автоклавированием ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.19.2.2¦к высоким концентрациям ¦исследование ¦Окраска мазка по Цилю-Нильсену (см. ¦врач- ¦ 13 ¦ - ¦
¦ ¦основных препаратов ¦ ¦п. 8.17.17.1). Подготовка к ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦(стрептомицин, изониазид, ¦ ¦исследованию: растворяют пиразинамид+------------+---------+-----------+
¦ ¦этамбутол) ¦ ¦путем добавления 4 мл стерильной ¦фельдшер- ¦ 5 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦дистиллированной воды во флаконы со ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стрептомицином, изониазидом, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦этамбутолом. Маркируют пробирки. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Добавляют по 100 мкл раствора ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦препаратов в соответствующие ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробирки до достижения концентраций ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦препаратов (мкг/л) стептомцин 4,0, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦изиниазид 0,4, этамбутол 7,5. В ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контрольную и опытные пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавляют по 800 мкл ростовой ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавки. Пробирку с суспензией ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микобактерий встряхивают на вортексе¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦для гомогенизации, оставляют на 5 - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦10 минут для осаждения крупных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦конгломератов. Готовят мазок из ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦осадка, окрашивают по Цилю-Нильсену,¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦просматривают под микроскопом с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦иммерсионной системой. Готовят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рабочее разведение суспензии 1:5 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Контролируют мутность суспензии с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦помощью нефелометра. Готовят рабочее¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦разведение суспензии 1:100 для ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦посева в контрольную пробирку, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавляя 0,1 мл суспензии в пробирку¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦с 10 мл стерильного физиологического¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствора. Посев. Стерильной пипеткой¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вносят 0,5 мл разведения 1:100 в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контрольную пробирку, 0,5 мл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рабочего разведения в пробирки с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦препаратами. Пробирки перемешивают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦переворачиванием несколько раз, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦устанавливают пробирки в держатель ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦MGIT. Держатели с пробирками ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦помещают в ящики прибора MGIT в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гнезда, указанные прибором на срок ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦до 21 дня, после чего регистрируют ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результат. Засевают 0,5 мл суспензии¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микобактерий из пробирки MGIT на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦чашку с кровяным агаром для контроля¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контаминации. Учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Пробирки обеззараживают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦автоклавированием ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.19.2.3¦к пиразинамиду ¦исследование ¦Окраска мазка по Цилю-Нильсену (см. ¦врач- ¦ 11 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦п. 8.17.17.1). Подготовка к ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦исследованию: растворяют пиразинамид+------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦путем добавления 2,5 мл стерильной ¦фельдшер- ¦ 5 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦дистиллированной воды, маркируют ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦опытную и контрольную пробирки. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Добавляют 100 мкл раствора ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пиразинамида в опытную пробирку до ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦достижения концентрации 100 мкг/мл. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦В контрольную и опытную пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавляют по 800 мкл ростовой ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦добавки PZA. Пробирку с суспензией ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микобактерий встряхивают на вортексе¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦для гомогенизации, оставляют на 5 - ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦10 минут для осаждения крупных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦конгломератов. Готовят мазок из ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦осадка, окрашивают по Цилю-Нильсену,¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦просматривают под микроскопом с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦иммерсионной системой. Готовят ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рабочее разведение суспензии 1:5 ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Контролируют мутность суспензии с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦помощью нефелометра. Готовят рабочее¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦разведение суспензии 1:10 для посева¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦в контрольную пробирку, добавляя 0,5¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мл суспензии в пробирку с 4,5 мл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стерильного физиологического ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствора. Посев. Стерильной пипеткой¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вносят 0,5 мл разведения 1:10 в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контрольную пробирку, 0,5 мл ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рабочего разведения в пробирку с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пиразинамидом. Плотно закрывают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пробки, перемешивают пробирки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦переворачиванием несколько раз, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦устанавливают пробирки в держатель ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦MGIT. Держатели с пробирками ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦помещают в ящики прибора MGIT в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гнезда, указанные прибором, на срок ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦до 21 дня, после чего регистрируют ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦результат. Засевают 0,5 мл суспензии¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микобактерий из пробирки MGIT на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦чашку с кровяным агаром для контроля¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контаминации. Учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Пробирки обеззараживают ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦автоклавированием ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.20 ¦микробиологические ¦исследование ¦Подготовка посуды. Подготовка ¦врач- ¦ 260 ¦ ¦
¦ ¦исследования клинического ¦ ¦питательных сред: приготовление ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦материала на холеру ¦ ¦жидкой (1% пептонная вода) и плотных+------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦(щелочной агар, TSBC, СЭДХ) ¦фельдшер- ¦ 266 ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦питательных сред. Посев исследуемого¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материала на 1-ю и через 6 - 8 часов¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦2-ю накопительные среды. Пересев на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦жидкие и плотные питательные среды ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦при 37 град. C через 12 - 16 часов. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Просмотр и отбор выросших колоний в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦посевах на плотные среды нативного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материала и в высевах из 1-й и 2-й ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦накопительных сред для первичной ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦идентификации выросших колоний при ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦37 град. C через 18 - 24 часа. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Приготовление мазков, окраска по ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Граму; световая и люминесцентная ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопия. Постановка РА с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦холерными сыворотками. Просмотр и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отбор выросших колоний в посевах на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦плотные среды при при 37 град. C ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦через 36 - 48 часов. Приготовление ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мазков, окраска по Граму; световая и¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦люминесцентная микроскопия. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Постановка РА с холерными ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦сыворотками. Проведение видовой ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦идентификации выделенных холерных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦вибрионов: постановка РА с холерными¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦сыворотками, определение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦чувствительности к бактериофагам, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦постановка биохимических тестов, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦определение антибиотикограммы и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦эпидемиологической значимости по ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦чувствительности к ctx+ и ctx-фагам ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦в сочетании с тестом Грейга на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гемолиз. Учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Обеззараживание материла и посуды ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.21 ¦Типирование клеток по ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦антигенам и генам ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦гистосовместимости (HLA) I и¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦II класса и антигену HLA В27¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.21.1 ¦типирование лимфоцитов по ¦исследование ¦1-й этап: подготовка клинического ¦врач- ¦ 75 ¦ - ¦
¦ ¦антигенам гистосовместимости¦ ¦материала и вспомогательных ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦(HLA) I класса ¦ ¦реактивов (приготовление навески +------------+---------+-----------+
¦ ¦серологическими методами ¦ ¦карбонильного железа, аликвоты ¦фельдшер- ¦ 85 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦лимфофлота). Проведение градиентного¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выделения лимфоцитов. Оценка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦качества и количества выделенных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лимфоцитов (процент жизнеспособности¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦и рабочая концентрация клеток) ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦2-й этап: проведение 2-х ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ступенчатого теста ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦комплементзависимой ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микролимфоцитотоксичности: ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦подготовка типирующей панели, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦внесение лимфоцитов в лунки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦типирующей панели, подготовка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦комплемента и люминесцентного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦красителя, внесение комплемента с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦красителем в лунки типирующей ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦панели, внесение в лунки стоп- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦раствора ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦3-й этап: учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микролимфоцитотоксического теста на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инвертированном люминесцентном ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопе. Анализ и выведение HLA ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦фенотипа. Утилизация отработанных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материалов и дезинфекция рабочего ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦места ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.21.2 ¦типирование лимфоцитов по ¦исследование ¦1-й этап: подготовка клинического ¦врач ¦ 50 ¦ - ¦
¦ ¦антигену HLA В27 ¦ ¦материала и вспомогательных ¦лабораторной¦ ¦ ¦
¦ ¦серологическими методами ¦ ¦реактивов (приготовление навески ¦диагностики ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦карбонильного железа, аликвоты +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦лимфофлота). Проведение градиентного¦фельдшер- ¦ 70 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦выделения лимфоцитов. Оценка ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦качества и количества выделенных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лимфоцитов (процент жизнеспособности¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦и рабочая концентрация клеток) ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦2-й этап: проведение 2-х ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ступенчатого теста ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦комплементзависимой микро- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лимфоцитотоксичности: подготовка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦типирующей панели, внесение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лимфоцитов в лунки типирующей ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦панели, подготовка комплемента и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦люминесцентного красителя, внесение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦комплемента с красителем в лунки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦типирующей панели, внесение в лунки ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стоп-раствора ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦3-й этап: учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микролимфоцитотоксического теста на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инвертированном люминесцентном ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦микроскопе и внесение в бланк ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦типирования. Принятие решения о ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦наличии HLA В 27. Утилизация ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отработанных материалов и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦дезинфекция рабочего места ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.21.3 ¦ДНК типирование генов ¦исследование ¦1-й этап: подготовка клинического ¦врач ¦ 320 ¦ - ¦
¦ ¦гистосовместимости (HLA) I ¦ ¦материала к анализу (выделение ¦лабораторной¦ ¦ ¦
¦ ¦класса методом полимеразной ¦ ¦лейковзвеси из крови, проведение ¦диагностики ¦ ¦ ¦
¦ ¦цепной реакции (ПЦР-SSR) ¦ ¦лизиса эритроцитов). Проведение +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦экстракции ДНК. Оценка качества и ¦фельдшер- ¦ 170 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦количества выделенной ДНК ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦2-й этап: приготовление ex tempore ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ингредиентов для проведения ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦полимеразной цепной реакции (ПЦР) с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦использованием панелей смесей ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦праймеров. Постановка и проведение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ПЦР амплификации ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦3-й этап: приготовление ex tempore ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦реагентов для анализа продуктов ПЦР ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦методом электрофореза в агарозе. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Внесение продуктов амплификации в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лунки агарозного геля. Проведение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦электрофореза исследуемых образцов в¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦агарозе. Цифровое фотографирование ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦агарозного геля в УФ-свете. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Компьютерная обработка изображения, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦интерпретация результатов анализа. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Утилизация отработанных материалов и¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦дезинфекция рабочего места ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦8.17.21.4 ¦ДНК типирование генов ¦исследование ¦1-й этап: подготовка клинического ¦врач ¦ 320 ¦ - ¦
¦ ¦гистосовместимости (HLA) II ¦ ¦материала к анализу (выделение ¦лабораторной¦ ¦ ¦
¦ ¦класса методом полимеразной ¦ ¦лейковзвеси из крови, проведение ¦диагностики ¦ ¦ ¦
¦ ¦цепной реакции (ПЦР-SSR) ¦ ¦лизиса эритроцитов). Проведение +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦экстракции ДНК. Оценка качества и ¦фельдшер- ¦ 170 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦количества выделенной ДНК ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦2-й этап: приготовление ex tempore ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ингредиентов для проведения ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦полимеразной цепной реакции (ПЦР) с ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦использованием панелей смесей ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦праймеров. Постановка и проведение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ПЦР амплификации ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦3-й этап: приготовление ex tempore ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦реагентов для анализа продуктов ПЦР ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦методом электрофореза в агарозе. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Внесение продуктов амплификации в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лунки агарозного геля. Проведение ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦электрофореза исследуемых образцов в¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦агарозе. Цифровое фотографирование ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦агарозного геля в УФ-свете. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Компьютерная обработка изображения, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦интерпретация результатов анализа. ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Утилизация отработанных материалов и¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦дезинфекция рабочего места ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦9 ¦Генетические и отдельные ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦биохимические исследования ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦9.1 ¦определение кариотипа в ¦исследование ¦Подготовка лабораторной посуды, ¦врач- ¦ 180 ¦ - ¦
¦ ¦лимфоцитах периферической ¦ ¦реагентов. Посадка культуры ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦крови человека ¦ ¦лимфоцитов крови (ЛК), +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦культивирование ЛК, внесение ¦фельдшер- ¦ 120 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦реагентов, центрифугирование, ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦внесение клеточной суспензии на ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предметные стекла, высушивание, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦приготовление красителя, окраска ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦препарата, оценка качества препарата¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦с помощью микроскопа Качественный и ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦количественный анализ хромосом ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(поиск метафазных пластинок, подсчет¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦дисков, от 10 до 100 метафазных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пластинок в зависимости от цели ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦исследования) ¦ ¦ ¦ ¦
+-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+
¦9.2 ¦определение кариотипа в ¦исследование ¦Взятие и регистрация образцов ¦врач- ¦ 180 ¦ - ¦
¦ ¦клетках амниотической ¦ ¦амниотической жидкости. Подготовка ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦жидкости ¦ ¦лабораторной посуды, реагентов, +------------+---------+-----------+
¦ ¦ ¦ ¦стерильных боксов. Посадка культуры ¦фельдшер- ¦ 120 ¦ - ¦
¦ ¦ ¦ ¦амниотической жидкости, ¦лаборант ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦культивирование клеток, оценка роста¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦культуры и субкультирование образцов¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦для получения монослоя, обработка ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦монослоя реагентами, окрашивание ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦препаратов, оценка качества ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦препаратов с помощью микроскопа ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Качественный и количественный анализ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦хромосом (поиск метафазных ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пластинок, подсчет хромосом, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦сличение гомологов, подсчет дисков ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦от 10 до 100 метафазных пластинок в ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦зависимости от цели исследования) ¦ ¦ ¦ ¦
Страницы: | Стр.1 | Стр.2 | Стр.3 | Стр.4 | Стр.5 | Стр.6 | Стр.7 | Стр.8 | Стр.9 | Стр.10 | Стр.11 | Стр.12 | Стр.13 | Стр.14 | Стр.15 | Стр.16 | Стр.17 | Стр.18 | Стр.19 | Стр.20 | Стр.21 | Стр.22 | Стр.23 | Стр.24 | Стр.25 | Стр.26 | Стр.27 | Стр.28 | Стр.29 | Стр.30 | Стр.31 | Стр.32 | Стр.33 | Стр.34 | Стр.35 | Стр.36 | Стр.37 | Стр.38 | Стр.39 | Стр.40 | Стр.41 | Стр.42 | Стр.43 | Стр.44 | Стр.45 | Стр.46 | Стр.47 | Стр.48 | Стр.49 | Стр.50 | Стр.51 |
| 
