Право
Навигация
Новые документы

Реклама


Ресурсы в тему
ПОИСК ДОКУМЕНТОВ

Приказ Министерства здравоохранения Республики Беларусь от 24 июня 1997 г. №154 "О дальнейшем совершенствовании системы контроля качества клинических лабораторных исследований"

Текст правового акта с изменениями и дополнениями по состоянию на 5 декабря 2007 года (обновление)

Библиотека законов
(архив)

 

Стр. 6

Страницы: Стр.1 | Стр.2 | Стр.3 | Стр.4 | Стр.5 | Стр.6 | Стр.7 | Стр.8

 
      Мазки крови         ¦    № 1   ¦    № 2     ¦      № 3
--------------------------+----------+------------+-----------------

Методика окраски

Клетки

Базофилы

Эозинофилы

Палочкоядерные нейтрофилы

Сердича сегменто-ядерные
нейтрофилы

Лимфоциты

Моноциты
--------------------------------------------------------------------

                Исследование консервированной крови

---------------------------T----------T-----------T-----------------
                           ¦          ¦           ¦   Результаты и
      Показатели           ¦  Метод   ¦  Прибор   ¦     единицы
                           ¦          ¦           ¦    измерения
---------------------------+----------+-----------+-----------------

Эритроциты

Гемоглобин

Лейкоциты

Тромбоциты

Цветовой показатель

         3. Протокол исследований химического состава мочи

Адрес учреждения ____________________      Код _____________________

Тип учреждения ______________________

Зав.лабораторией ____________________

Ответственный за контроль ___________

Дата исследования ___________________      Подпись

-------------------------T----------T----------T--------------------
      Показатели         ¦   Метод  ¦  Прибор  ¦    Результаты и
                         ¦          ¦          ¦  единицы измерения
-------------------------+----------+----------+--------------------

Общий белок

Глюкоза

Скрытая кровь

Ацетон

Билирубин

Мочевина

Реакция (рН)
--------------------------------------------------------------------

                XIII. ПЕРЕЧЕНЬ КОНТРОЛЬНЫХ МАТЕРИАЛОВ

     1. Контрольные  сыворотки  и   препараты   для   биохимических,
гематологических   и   других   видов   исследований  всех  инофирм,
разрешенные к применению на территории республики,  в соответствии с
используемым  референтным методом установления контрольных значений:
Lасhеmа  (Чехия),  Lаbsуstеms  (Финляндия),  Аbbоtt  (США),  Весkmаn
(США),   Соrmау  (Польша),  Ноffmаnn  lа  Rосhе  (Швейцария),  Вауеr
(Австрия), Воеhringеr Маnnheim и Humаn (Германия).
     2. Ставропольский  НИИ  вакцин и сывороток (Россия). Сероконт-В
- контрольная  лошадиная сыворотка  для  контроля  воспроизводимости
результатов    исследований  ручными  и  автоматическими   методами.
Сероконт  П-эквин - контрольная  лошадиная сыворотка с исследованным
содержанием  компонентов  в  нормальной  концентрации  для  контроля
правильности  результатов исследований ручными и автоматизированными
методами.  Патосероконт-П-эквин  - контрольная лошадиная сыворотка с
исследованным  содержанием компонентов в патологической концентрации
для   контроля  правильности  результатов  исследований  ручными   и
автоматическими    методами.  Сероконт-П  контрольная   человеческая
сыворотка    для  контроля  правильности  результатов   исследования
липидных     компонентов.   Контрольная  человеческая  сыворотка   с
исследованным  содержанием компонентов в нормальной концентрации для
контроля    правильности    результатов    исследования   активности
ферментов.

       Перечень контрольных материалов для исследования мочи

     1. Контрольные    материалы    с    исследованным   содержанием
компонентов  в  нормальной  концентрации  для  контроля правильности
результатов исследований химического состава мочи.
     2. Контрольные    материалы    с    исследованным   содержанием
компонентов  в патологической концентрации для контроля правильности
результатов исследований химического состава мочи.

       Перечень контрольных материалов для коагулологических
                           исследований

     1. Стандартный    препарат    тромбопластина  с   установленным
временем.
     2. Контрольная  человеческая  плазма  с  установленным временем
частично активированного тромбопластина (АЧТВ).
     3. Контрольная  человеческая  плазма  с  расширенными   тестами
коагулограммы.

        ХIV. ПРОФ.КОНЕВАЛОВА Н.Ю. (РЕСПУБЛИКАНСКИЙ ЛИПИДНЫЙ
     ЛЕЧЕБНО-ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ КОНСУЛЬТАТИВНЫЙ ЦЕНТР, г.ВИТЕБСК)

   10. Особенности проведения контроля качества при исследованиях
                          липидного обмена

     Международные  эпидемиологические и проспективные исследования,
такие,  например,  как  Фремингемское,  показали,  что частота ИБС в
популяции  закономерно  возрастает  с  повышением уровня холестерина
(ХС) в сыворотке крови. Классическим доказательством связи риска ИБС
с  уровнем ХС в сыворотке стали результаты 6-летнего многоцентрового
наблюдения  за   361662 мужчинами в возрасте от 35 до 57 лет. В этом
исследовании  было  обнаружено,  что  смертность  от  ИБС   является
наименьшей  среди  мужчин  с уровнем ХС 181 мг/дл (4,68 ммоль/л) или
ниже.  С  повышением  уровня  ХС  выше  181  мг/дл смертность от ИБС
возрастала. Так, при уровне ХС от 182 до 202 мг/дл она увеличивалась
в  среднем  в 1,3 раза, от 203 до 221 мг/дл - в 1,7 раза. У мужчин с
уровнем ХС в сыворотке крови выше 245 мг/дл риск смерти от ИБС был в
3,4 раза больше, чем у мужчин с уровнем ХС 182 мг/дл или ниже.
     Говорить только о холестерине, характеризуя липидные нарушения,
- это очень упрощенный подход к данной проблеме.  Липидные нарушения
имеют   гораздо   более   сложный   характер  и  оптимально  для  их
характеристики определять три показателя.  Это -  общий  холестерин,
холестерин   ЛПВП   и  триацилглицерины.  Если  эти  три  показателя
определены,  то дальше можно рассчитать и холестерин ЛПНП,  ЛПОНП  и
различные  коэффициенты,  отражающие соотношения холестерина высокой
плотности  и  холестерина  низкой  плотности.  Но   в   практической
деятельности очень часто обходятся определением общего холестерина и
этого часто оказывается вполне достаточно.  Это особенно  важно  для
нашей  страны,  так  как определение других реакций липидов возможно
только в  специализированных  учреждениях.  Что  считать  нормальным
уровнем    холестерина?    Раньше,   оценивая   нормальный   уровень
холестерина,  говорили о каких-то региональных уровнях,  в настоящее
время для всего мира характеристики нормального и повышенного уровня
холестерина едины.  Нормальный уровень холестерина - это  200  мг/дл
или  5,2  ммоль/л и ниже.  До 250 мг/дл или 6,5 ммоль/л - это легкая
гиперхолестеринемия.  От 250 до 300 мг/дл (или 7,3  ммоль/л)  -  это
умеренная гиперхолестеринемия, высокая гиперхолестеринемия - ХС выше
100 мг/дл.

         10.1. Взятие крови для исследования липидов плазмы

     Содержание липидов  в  плазме   и   соотношения   липопротеинов
являются вариабельными  величинами,  на  которые  влияют прием пищи,
курение,  потребление алкоголя,  изменения диеты,  поза  больного  и
стресс.  Важно, чтобы  условия  взятия  образцов крови при первичном
обследовании  и  при  последующих  анализах  были   стандартными.  В
некоторых  случаях  может оказаться необходимым повторение анализов,
чтобы  добиться  получения  наиболее  воспроизводимых   результатов.
Следующие факторы являются важными.
     1. Перед взятием крови пациент должен голодать в течение  14-16
ч.  Больному  не  следует  делать  внутривенные  вливания жидкостей,
содержащих липиды.
     2. Перед  проведением  исследования  в течение 2 недель пациент
должен находиться на обычной для него диете и масса его тела  должна
оставаться постоянной.
     3. Если  не  проводится мониторинг лечения, больному не следует
назначать  какие-либо  терапевтические мероприятия,  направленные на
понижение содержания липидов в плазме.
     4. На  определяемые  величины концентрации липопротеинов влияют
застой крови в венах и поза пациента.  При взятии крови у больного в
положении   лежа   концентрация  холестерина  в  плазме  может  быть
приблизительно на 10% ниже, чем при взятии крови у этого же больного
в    положении    стоя.    Зависимость   определяемой   концентрации
триацилглицеринов  от  позы  пациента  может  быть  даже   несколько
большей.  При  оценке эффекта лечения путем серии повторных анализов
важно стандартизовать процедуру взятия крови. Например, в течение 30
мин перед взятием крови больному следует сидеть.
     5. Проведение  исследований,  направленных   на   выявление   и
характеристику  типа  гиперлипидемий,  предпочитают  отложить  на  3
месяца после инфаркта миокарда,  больших хирургических операций  или
любой  тяжелой  болезни,  поскольку стресс может изменять содержание
липидов  в  плазме.  Однако  исследования  проб  крови,  взятой   на
протяжении   первых  12  ч  после  инфаркта  миокарда,  по-видимому,
отражают истинные величины содержания липидов в плазме.
     6. Не  следует  гепаринизировать  пробы  крови;  необходимо  по
возможности  быстро  отделить  плазму  или  сыворотку  от  клеточных
элементов крови.

       10.2. Измерение концентрации общего холестерина крови

     Точное измерение концентрации общего холестерина и холестерина,
связанного с  липопротеинами  различной  плотности,  необходимо  для
правильного определения степени риска заболевания,  а также контроля
лечения. При применении соответствующей диеты содержание холестерина
можно  снизить  на 10-15%,  но использование метода,  дающего ошибку
10-15%,  не позволяет  следить  за  такими  изменениями.  Поэтому  в
клинических  лабораториях должна быть достигнута точность измерения,
при которой коэффициент вариации должен быть не выше 3-5%.
     На  уровень  ХС  оказывают  влияние предшествующий прием пищи и
алкоголя,   интенсивные  физические  тренировки,   фармакологические
препараты,    включая    гормональные    контрацептивы,    стероиды,
гиполипидемические препараты.
     Сезонные  и дневные вариации не оказывают существенного влияния
на уровень ХС в сыворотке крови.
     Для определения  ХС  можно  использовать  сыворотку  или плазму
крови.  В качестве антикоагулянта для  получения  обычно  используют
"сухой"   ЭДТА  (1  мг  на  1  мл  крови),  который  обладает  также
антиоксидантными свойствами.  Концентрация ХС в сыворотке  крови  на
2-4%  ниже,  чем  в плазме крови.  После центрифугирования сыворотку
крови   следует   быстро   отделить   от   кровяного   сгустка   для
предотвращения динамического обмена свободного ХС между сывороткой и
мембраной эритроцитов.  Если определение не проводят в тот же  день,
то  образцы  сыворотки могут быть заморожены и сохранены при -20°С в
течение нескольких месяцев, а при -80°С - в течение нескольких лет.
     После  оттаивания  сыворотку  крови  тщательно перемешивают. ХС
достаточно  стабилен  в  сыворотке  крови,  но  денатурация белков в
процессе микробного роста может изменить экстракцию ХС.
     Методы  определения  ХС  в сыворотке крови многочисленны; можно
выделить  химические, ферментные и физико-химические. В свою очередь
среди    химических    методов    выделяют    прямые    и   непрямые
(экстракционные).
     Основой прямых  методов   определения   ХС   является   реакция
Либерманна-Бурхардта,   в   которой   ХС   взаимодействует со смесью
серной,  уксусной кислот и уксусного ангидрида.  Реакция протекает в
сильно  кислой  безводной  среде.  В результате окисления образуется
окрашенное соединение, но развивающаяся окраска неустойчива, поэтому
время фотометрирования следует точно выдерживать. В литературе можно
встретить    разное    соотношение    ингредиентов    в     реактиве
Либерманна-Бурхардта; чем выше содержание уксусного ангидрида, тем с
большей скоростью протекает реакция.
     Реакция ХС   со  смесью  Либерманна-Бурхардта  неспецифична.  В
реакции прямого определения   ХС-реакционная  смесь  со  стандартным
раствором  имеет  изумрудный  цвет;  пробы  сыворотки  могут  давать
зеленый,  голубой,  бурый цвет.  Это связано  с  тем, что,  учитывая
значительное эндогенное образование тепла, в реакцию вступают многие
компоненты    сыворотки    крови.    Кроме    того,    в     реакции
Либерманна-Бурхардта  свободный  ХС  и  его  эфиры формируют цветные
комплексы с разным  коэффициентом  молярного  поглощения:  в  случае
эфиров   оптическая   плотность   оказывается   более  высокой.  Это
изначально  вносит  ошибку  в  исследование,  поскольку   неизвестно
отношение свободный ХС:  эфиры в каждой из проб.  При определении ХС
большое значение имеет выбор условий  реакции  с  учетом  того,  что
стабильность    реактива    Либерманна-Бурхардта    ограничена.   На
определение  ХС  влияют  многие  факторы:  соотношение  реагентов  в
реакционной среде, количество воды, время и температура реакции; это
требует стандартизации условий определения.
     Многие компоненты   сыворотки   крови   реагируют  с  реактивом
Либерманна-Бурхардта,  давая сходную с ХС  окраску.  Билирубин  дает
наибольшую неспецифическую реакцию (1 мг билирубина эквивалентен 5-6
мг ХС);  в реакции Киллиани-Зака интерференция  билирубина  является
меньшей. Гемоглобин, мочевая кислота, витамин А и стероиды влияют на
ход  реакции.  Все  галогены,   нитраты   и   нитриты,   салицилаты,
полиненасыщенные   кислоты   также  дают  интерференцию.  По  данным
В.Н.Титова и др.,  неспецифическое завышение результатов при  прямом
определении ХС составляет 11%.
     Другим распространенным методом определения ХС является реакция
Киллиани-Зака:  реакция  ХС  с  солями  железа,  уксусной  и  серной
кислотами.  Описано  много  модификаций  способа:  цитрат  и  фосфат
добавляют для стабилизации окраски,  имеющей максимум  поглощения  в
зеленой области спектра, при этом максимум поглощения образовавшихся
соединений меняется от  420  до  563  нм.  В  реакции  Киллиани-Зака
свободный ХС и его эфиры дают сходные по молярной экстинкции цветные
комплексы.
     При непрямых   методах   липиды   из  сыворотки  крови  вначале
экстрагируют  органическими  растворителями,  а   после   упаривания
выполняют   реакцию   Либерманна-Бурхардта.   Такие   методы   более
воспроизводимы    и    специфичны,    поскольку    удается    убрать
интерферирующие вещества,  остающиеся в водной фазе.  Для экстракции
используют системы  этанол  -  диэтиловый  эфир,  этанол  -  ацетон,
метанол - хлороформ;  наиболее часто применяют гексан, изопропиловый
спирт.  Включение этапа экстракции  повышает  специфичность  метода;
результаты определения ХС на 7% ниже, чем при прямом методе.
     Трехстадийные   методы,  помимо  экстракции  ХС   органическими
растворителями,  включают этап гидролиза эфиров ХС гидроокисью калия
или  натрия.  Экстракция липидов в неполярный растворитель, омыление
эфиров  ХС  и  повторная экстракция ХС из омыленной смеси составляют
основу референтных методов.
     В качестве   референтного   метода   наиболее  предпочтительным
является метод Абелла-Кендалла,  предложенный в 1952 году. В  методе
Абелла-Кендалла  эфиры  ХС  омыляют  спиртовым  раствором гидроокиси
калия и экстрагируют петролейным эфиром (фракция  40°-60°).  Реакцию
Либерманна-Бурхардта ставят после упаривания петролейного эфира.
     Трудности  приготовления стандартных растворов ХС связаны с его
гидрофобностью.  Длительное  время  в качестве стандартного раствора
применяли  раствор  ХС  в ледяной уксусной кислоте. В таких условиях
через  определенное время весь ХС оказывался в форме ацетата ХС, что
приводило    к    систематической   ошибке  (занижение   результатов
определения). Далее в качестве стандартного был предложен раствор ХС
в  изопропаноле.  Однако  изопропиловый  спирт  испаряется, является
гигроскопичным;    стандартные    растворы  приходилось  хранить   в
холодильнике, эксикаторе и прогревать до комнатной температуры перед
дозированием.  К  тому  же  такой  "стандарт" оказался неудобным при
ферментативных    методах  определения  ХС,  поскольку   изопропанол
неспецифически  активировал  ферментные  системы, завышая оптическую
плотность.  Затем  в  качестве  стандарта  были  предложены   водные
растворы  ХС.  Методы  приготовления  водного  раствора  ХС являются
многоэтапными  и  довольно  трудоемкими.  На I этапе ХС растворяют в
органическом  растворителе  (этанол, изопропанол, изобутанол). На II
этапе  смешивают раствор ХС с буфером, содержащим детергент, который
способствует    формированию  мицеллярных  структур.  В   результате
включения  ХС  в  мицеллы,  образованные детергентом, происходит его
солюбилизация.
     Можно приготовить  раствор  ХС  и  без  применения органических
растворителей и детергентов.  Для солюбилизации ХС в концентрации  5
г/л   Аbеll и соавт. использовали дезоксихолат натрия в концентрации
150 г/л   в 0,15 М  NаСl.  Однако  применение  водных  растворов  ХС
неудобно: их нельзя замораживать и длительно хранить в холодильнике.
При  комнатной  температуре  происходит  старение  растворов  ХС   с
необратимыми   изменениями,  связанными  с  образованием  комплексов
микрокристаллов ХС.  Для определения ХС при работе с  биохимическими
анализаторами  общепринято  использование  калибраторов  - сывороток
крови, уровень ХС в которых определен референтными методами.
     Несмотря  на  относительную  простоту  исполнения  и  дешевизну
процедуры,  химические методы токсичны, применение их на современных
анализаторах   вызывает  коррозию  системы.  95%  лабораторий   мира
используют  ферментативный  способ  определения  ХС.  Преимуществами
этого  способа  являются: проведение реакции в водной фазе; удобство
автоматизации; высокая чувствительность и специфичность.
     В настоящее время,  как правило,  ферментативное определение ХC
проводится с помощью готовых наборов  реактивов,  выпускаемых  рядом
зарубежных фирм. Эти наборы содержат все необходимые для определения
ХС-компонента в точно отмеренных количествах, что еще более упрощает
и ускоряет процедуру анализа.
     Методические трудности энзиматического определения ХС связаны с
гетерогенностью распределения ХС между ЛП, а также с активностью его
эстерификации в крови.  Свободный ХС  располагается  на  поверхности
мицеллярного  комплекса,  а  эфиры  ХС  погружены внутрь ЛП-частицы.
Поэтому,   прежде   чем   эфиры    ХС    станут    доступными    для
холестеролэстеразы,    необходимо    разрушить    ЛП-частицы.    Для
солюбилизации ХС применяют детергент  (тритон,  твин,  соли  желчных
кислот).  Детергенты  образуют мицеллоподобные структуры,  в которые
включен ХС.  В таких условиях реакция происходит на разделе фаз,  на
поверхности   мицеллярных   комплексов.   Однако  солюбилизируя  ХС,
некоторые  детергенты  ингибируют  активность  холестеролэстеразы  и
холестеролоксидазы.
     Полнота гидролиза  эфиров  ХС  зависит и от источника выделения
фермента.  Холестеролэстераза  микробов  более  активно  гидролизует
эфиры  ХС,  образованные  насыщенными  жирными кислотами,  тогда как
панкреатическая - эфиры ХС,  образованные полиненасыщенными  жирными
кислотами.
     Одним из  следствий  неполноты гидролиза ЭХС,  по мнению многих
иследователей,  могут быть более низкие значения концентрации  ХС  в
сыворотке крови,  получаемые некоторыми ферментативными методами, по
сравнению   со   значениями,   определяемыми   химическим    методом
Абеля-Кендала. Концентрация ХС в сыворотке, по данным ферментативных
методов,  может быть ниже,  чем полученная методом Абеля-Кендала  на
2,6-4,9% и даже на 20%.
     Кроме неполноты гидролиза ЭХС, причиной несколько заниженных по
сравнению  с  химическим  методом результатов ферментного анализа ХС
может быть высокая специфичность последнего.
     Калибровку ферментных   методов  определения  ХС  проводят  при
помощи  первичных  или  вторичных  стандартов.  Первичные  стандарты
представляют  собой  растворы  ХС  или  его  эфиров  в  органических
растворителях  или  в  водных  растворах  детергентов.  В   качестве
вторичных   стандартов   используют   сыворотки  крови  с  известным
содержанием   ХС    (калибровочные    сыворотки).    Калибровка    с
использованием  вторичных  стандартов  является  предпочтительной  в
сравнении с калибровкой по  первичным  стандартам.  В  ряде  случаев
ферментативный  гидролиз  ЭХС проходит не до конца вследствие низкой
скорости гидролиза ЭХС некоторых жирных кислот. Возникающее при этом
занижение   результатов  анализа  может  быть  в  значительней  мере
уменьшено при калибровке по сывороточным стандартам,  имеющим состав
эфиров,  близкий  к таковому в анализируемой пробе.  Показано также,
что скорость образования хромогена при анализе  ХС  сыворотки  крови
выше,  чем при анализе первичного стандарта. Использование первичных
стандартов ХС для калибровки анализа ХС в сыворотке может  приводить
к  получению  завышенных  результатов  по сравнению с калибровкой по
вторичному стандарту (при фиксированном времени и условиях анализа),
что  следует  принимать  во  внимание при выборе способа калибровки.
Наличие детергентов,  добавляемых в водные стандартные растворы ХС и
его   эфиров,   а   также   присутствие  спиртов,  используемых  для
приготовления  первичных  стандартов,  могут  приводить  к  снижению
ферментативной активности холестеролэстеразы и холестеролоксидазы.
     Использование в  качестве  калибратора  некоторых  коммерческих
сывороток   может   приводить  к  завышению  результатов  вследствие
высокого содержания в них эфиров  уксусной  и  арахидоновой  кислот,
добавляемых   для   повышения   концентрации   ХС   и  гидролизуемых
холестеролэстеразой с относительно низкой скоростью. Предполагается,
кроме   того,   что   холестеролэстераза  может  инактивироваться  в
присутствии  компонентов  коммерческой   сыворотки.   Применение   в
качестве  калибратора  нативной  замороженной  сыворотки с известным
содержанием  ХС,  которая  по  составу  ЭХС   мало   отличается   от
анализируемой,  является  лучшим способом достижения высокой степени
правильности получаемых результатов.
     Несмотря на   высокую   специфичность,  результаты,  получаемые
ферментными  методами   анализа   зависят   от   влияния   некоторых
соединений,   обычно   присутствующих   в   сыворотке   (гемоглобин,
билирубин, мочевая кислота и др.) или введенных извне (лекарственные
препараты).  Однако  мешающее  влияние мочевой кислоты и гемоглобина
наблюдается   лишь   в   концентрациях,   значительно    превышающих
физиологические - 20 и 100 мг/дл соответственно.  При анализе сильно
гемолизированной       сыворотки        методами,        включающими
фенол-4-аминоантипирин-пероксидазную  систему,  могут  быть получены
завышенные  величины   вследствие   взаимодействия   гемоглобина   с
хромогенной   системой.   Этот  эффект  может  быть  устранен  путем
вычитания оптического поглощения реакционной  смеси,  не  содержащей
холестеролоксидазы, из величины поглощения полной реакционной смеси.
     В отличие    от    гемоглобина    присутствие    билирубина   в
концентрациях,  близких  к  физиологическим,  приводит  к  занижению
результатов на 1-6%. В большей степени влиянию билирубина подвержены
ферментные  методы,  основанные  на  стехиометрическом   определении
перекиси водорода.  Эффект билирубина имеет двойную природу: с одной
стороны,  билирубин взаимодействует с гидроперекисью, образовавшейся
в   процессе   реакции   холестеролоксидазы,  конкурируя  за  нее  с
пероксидазой  и  уменьшая  количества  гидроперекиси,  вступающей  в
реакцию с хромогенной системой.  С другой стороны,  взаимодействуя с
перекисью водорода, билирубин разрушается, что приводит к уменьшению
поглощения  этим  соединением  в области 500 нм.  Влияние билирубина
можно   в   значительной   степени   уменьшить,    создав    условия
преимущественного   протекания   реакции   по   пероксидазному  пути
посредством увеличения концентрации пероксидазы в реакционной среде.
Степень   интерференции   билирубина   прямо   пропорциональна   его
концентрации и не зависит от содержания ХС.  При анализе сывороток с
известным  содержанием  билирубина расчет концентрации ХС может быть
проведен  с  учетом  соответствующей  поправки.  Для  уменьшения  до
минимума влияния билирубина предлагают добавлять в реакционную смесь
ферроцианид калия.
     Глюкоза и   креатинин   в   концентрациях,   в   несколько  раз
превышающих  физиологические,  не  оказывают  заметного  влияния  на
результаты  анализа.  Аскорбиновая  кислота  даже  в физиологических
концентрациях  может  занижать  результаты  анализа  ХС   ферментным
методом   на  1-8%.  Присутствие  в  сыворотке  этого  соединения  в
терапевтических  концентрациях   (около   10   мг/дл)   приводит   к
значительному (35%-75%) занижению результатов.
     Липемия   может  обусловливать  небольшое  (до  3%)   занижение
результатов  определения ХС-ферментным методом, причем степень этого
занижения различна для разных методов.
     Разнообразие существующих    в    настоящее    время   способов
ферментного   анализа   обусловливается   различиями   в    способах
определения  продуктов  его  окисления,  образующихся  в  результате
холестериноксидазной реакции.  Концентрация одного из продуктов этой
реакции  - холест-4-ен-З-она - может быть определена непосредственно
по изменению поглощения реакционной смеси  при  240  нм.  Наибольшее
распространение, однако, получили фотометрические методы, основанные
на количественном определении другого продукта  холестериноксидазной
реакции   -   перекиси   водорода.  В  табл.1  представлена  сводная
информация о современных фотометрических ферментных методах  анализа
ХС  в  сыворотке  и  плазме  крови,  наиболее  часто  используемых в
клинических  лабораториях.  Окрашенные  продукты,  образующиеся  при
взаимодействии  перекиси с компонентами используемых при этом разных
хромогенных систем,  поглощают в видимой области спектра и стабильны
в   течение   60-90   мин,   что  в  значительной  степени  упрощает
фотометрирование и позволяет использовать наиболее  распространенные
в  клинических лабораториях фотометры и автоанализаторы.  Эти методы
характеризуются хорошей воспроизводимостью,  линейностью  в  широком
диапазоне концентраций ХС.

                                                           Таблица 1

    Наиболее распространенные фотометрические ферментные методы
          количественного определения ХС в сыворотке крови

---------T-----------T---------------------------T------------T-------T-------
         ¦           ¦       Условия анализа     ¦Коэффициент ¦Коэффи-¦
Употреб- ¦  Система  ¦                           ¦  вариации  ¦циент  ¦Линей-
ляемое   ¦определения¦------T------T-----T-------+-----T------+корре- ¦ность
название ¦ перекиси  ¦      ¦      ¦     ¦отноше-¦внут-¦меж-  ¦ляции с¦метода,
метода   ¦ водорода  ¦длина ¦время,¦тем- ¦ние    ¦рисе-¦серий-¦методом¦ммоль/л
         ¦           ¦волны,¦ мин  ¦пера-¦объемов¦рий- ¦ный   ¦Абеля- ¦
         ¦           ¦нм    ¦      ¦тура ¦проба/ ¦ный  ¦  %   ¦Кендала¦
         ¦           ¦      ¦      ¦     ¦реагент¦  %  ¦      ¦       ¦
---------+-----------+------+------+-----+-------+-----+------+-------+-------

CHOD-РАР  4-ААД/фенол   500    10     25   1/100   1,0-  1,3-   0,987   До
          пероксидаза  (546)    5     37           3,0   6,0            18-25

Метод     Метанол/      405   60-75   37   1/250   2,0   3,0    0,996   До 25
Кагеяма   каталаза
          Ацетилаце-
          тон/аммиак

Метод     Иодид калия   365    30     25   1/200    -    3,0    0,950   До
Хеккеля-  Молибден     (405)   20     30                                12-15
Перлика   аммония
Меркотест Этанол/       340    20     21   1/100    -    3,0-   0,950   До 11
          каталаза                                       4,4
          НАДР/АДГ

АБТС      АБТС/         410    -      30   1/250   0,2-   -     0,990   До 13
[7б]      пероксидаза                              1,1
                       (650)  КИН
------------------------------------------------------------------------------

     Примечание. 4-ААП      -      4-аминоантипирин;      АДГ      -
альдегиддегидрогеназа;                     АБТС                    -

Страницы: Стр.1 | Стр.2 | Стр.3 | Стр.4 | Стр.5 | Стр.6 | Стр.7 | Стр.8




< Главная

Новости законодательства

Новости сайта
Новости Беларуси

Новости Спецпроекта "Тюрьма"

Полезные ресурсы

Разное

Rambler's Top100
TopList

Законы России

Право - Законодательство Беларуси и других стран

ЗОНА - специальный проект. Политзаключенные Беларуси

LawBelarus - Белорусское Законодательство

Юридический портал. Bank of Laws of Belarus

Фирмы Беларуси - Каталог предприятий и организаций Республики Беларусь

RuFirms. Фирмы России - каталог предприятий и организаций.Firms of Russia - the catalogue of the enterprises and the organizations