|
|
|
|
Навигация
Новые документы
Реклама
Ресурсы в тему
|
Постановление Министерства здравоохранения Республики Беларусь от 28.11.2007 № 131 "Об утверждении единых норм и нормативов материальных и трудовых затрат (времени, расхода основных и вспомогательных материалов) на платные медицинские услуги по лабораторной диагностике, оказываемые юридическими лицами всех форм собственности и индивидуальными предпринимателями в установленном порядке"< Главная страница Стр. 5Страницы: | Стр. 1 | Стр. 2 | Стр. 3 | Стр. 4 | Стр. 5 | Стр. 6 | Стр. 7 | Стр. 8 | Стр. 9 | Стр. 10 | Стр. 11 | Стр. 12 | Стр. 13 | Стр. 14 | Стр. 15 | Стр. 16 | Стр. 17 | Стр. 18 | Стр. 19 | Стр. 20 | капилляры в вертикальном
положении помещают на 18 -
24 ч в термостат при
температуре 37 °C; после
инкубации учитывают
результат реакции под
микроскопом
7.8.4. с использованием
моноклональных антител
7.8.4.1. иммуноморфологическим исследование Приготовление смеси врач- - 35
исследованием фиколл-верографин. Пробу лаборант
крови оставляют для
отстаивания на 0,5 - 1 фельдшер- - 120
час. Отбор и наслаивание лаборант
плазмы с небольшим
количеством интерфазного
слоя над клеточным осадком
на смесь фиколл-
верографин.
Центрифугирование. Снятие
интерфазного слоя, перенос
в чистую пробирку.
Добавление
физиологического раствора,
перемешивание,
центрифугирование. Снятие
надосадочной жидкости.
Снова добавление
физиологического раствора,
перемешивание,
центрифугирование. Отмывка
лимфовзвеси проводится 2
раза. Снятие надосадочной
жидкости. Встряхивание
осадка. Подсчет количества
лимфоцитов в отмытой
взвеси клеток в камере
Горяева под микроскопом.
Расчет необходимого
количества
физиологического раствора
для разведения
лимфовзвеси. Приготовление
суспензии
лимфоцитов путем
добавления физраствора к
имеющемуся объему взвеси
лимфоцитов. Внесение в
лунки планшета необходимых
CD-диагностикумов и
суспензий лимфоцитов.
Инкубация в термостате.
Центрифугирование.
Инкубация в холодильнике.
Приготовление рабочей
концентрации глутарового
альдегида и добавление его
для фиксации в каждую
ячейку планшета. Удаление
глутарового альдегида.
Приготовление препарата из
осадка лунок планшет на
предметном стекле.
Высушивание, фиксация,
окраска препарата.
Микроскопия препарата под
иммерсионной системой.
Дезинфекция проб, посуды и
рабочего места
7.8.4.2. методом проточной исследование Маркировка пробирок. врач- - 40
цитометрии Раскапывание нативного лаборант
биоматериала и реагентов.
Инкубация. Лизирование
эритроцитов и отмывание
клеток с
центрифугированием
Выделение мононуклеаров в
градиенте плотности.
Лизирование оставшихся
эритроцитов. Мечение
моноклональными
антителами. Инкубирование.
Стабилизация раствором.
Настройка проточного
цитометра. Исследование
реакционной смеси. Анализ
полученных результатов.
Дезинфекция
7.9. определение концентрации
основных классов и
подклассов
иммуноглобулинов
7.9.1. методом радиальной
иммунодиффузии
7.9.1.1. с приготовлением и исследование Подготовка буфера: 1,5 г врач- - 6
заливкой агара, агара растворяют в 100 мл лаборант
построением калибровочной буфера на водяной бане,
кривой охлаждают до 48 °C и фельдшер- - 2
смешивают с АС, подогретой лаборант
до той же температуры, в
соответствии с
инструкцией. Наносят
пипеткой 2 мл смеси на
предметное стекло,
установленное строго
горизонтально на
подставке, нагретой до
35 - 40 °C. Золь агара,
содержащий АТ,
распределяется по
поверхности предметного
стекла и застывает слоем
толщиной 1 мм. На
предметном стекле в слое
геля вырезают по 8 лунок
(и более) при помощи
отшлифованной стеклянной
трубки, соединенной с
водоструйным насосом.
Отбирают нужный объем и
готовят разведения
стандартов в отдельном
планшете. В каждую из
лунок вносят по 2 мкл
раствора антигена
(стандартов и образцов).
Реакцию простой радиальной
ИД проводят во влажной
камере 24 - 48 часов.
Препараты высушивают и
окрашивают. К моменту
завершения диффузии
наблюдается прямая
линейная зависимость между
исходной концентрацией АГ
и площадью преципитата.
Проводят измерение колец
преципитации стандартов и
исследуемых образцов с
помощью микроскопа.
Построение калибровочной
кривой и проведение
расчетов концентраций
проб. Дезинфекция проб и
рабочего места
7.9.1.2. с использованием готовых исследование В готовые планшеты с врач- - 6
иммунодиффузионных планшет лунками добавляют лаборант
предварительно разведенные
образцы. Планшеты помещают фельдшер- - 2
во влажную камеру. лаборант
Инкубируют, высушивают и
окрашивают. Для построения
графика берут логарифм
концентрации АГ и как
функцию от него площадь
преципитата, квадрат
диаметра зоны преципитации
или логарифм диаметра
преципитата. Проводят
оценку преципитата
7.9.2. методом исследование Приготовление реагентов: врач- - 8
иммуноэлектрофореза на краситель - содержимое лаборант
геле агара или агарозы флакона разбавляем
дистиллированной водой, фельдшер- - 2
обесцвечиватель - лаборант
содержимое флакона
разбавляем
дистиллированной водой,
фиксаж - смешиваем этанол,
уксусную кислоту,
дистиллированную воду;
разбавляем сыворотку
рабочим раствором, наносим
пробы на гель, удаляем
избыток сыворотки,
помещаем пластинку с
агарозой в камеру,
проводим электрофорез 20
мин., затем фиксируем 15
мин., сушим, погружаем
пластинку в краситель,
следующим этапом в
обесцвечиватель, сушим,
сканируем, распечатываем
результаты
7.9.3. турбидиметрическим методом исследование В пробирке смешивают врач- - 2
сыворотку и реактив 1, лаборант
тщательно перемешивают
стеклянной палочкой. фельдшер- - 2
Инкубируют 10 мин. при лаборант
комнатной температуре.
Центрифугируют 15 мин.
Отбирают центрифугат, и к
нему добавляют реактив 2.
Инкубируют 15 мин.
Измеряют оптическую
плотность на
фотоэлектроколориметре.
Результаты сравнивают с
результатом контрольной
пробы. Разница их значений
отражает концентрацию
определяемого вещества
7.9.4. методом иммуноферментного
анализа
7.9.4.1. полуавтоматизированный исследование Отбор образцов и врач- - 3
расчет стандартов и внесение их в лаборант
пробирки или лунки
планшета, на которых фельдшер- - 4
предварительно проводят лаборант
процедуру фиксации,
отмывки, закрепления АТ
(антитело) или АГ
(антиген). (На готовых
тест-системах АГ или АТ
заранее фиксированы в
лунках). Инкубация 30 - 60
мин. (и более) в
термостатируемом плашечном
шейкере. Избыток АТ или АГ
не образовавшихся
комплексов удаляют. Во все
ячейки вносят отмывающий
буфер, затем его удаляют.
Процедуру отмывки проводят
4 - 5-кратно вручную или с
помощью отмывающего
устройства. Готовят
конъюгат. Затем вносят во
все ячейки конъюгат,
меченый ферментом АГ или
АТ. Инкубируют в
термостатируемом плашечном
шейкере 30 - 60 мин.,
проводят 4-кратное
отмывание планшета или
пробирок. Готовят субстрат
для ферментативной
реакции. Инкубируют в
темноте 20 - 30 мин.
Останавливают реакцию
добавлением стоп-реагента.
Проводят
спектрофотометрическое
определение абсорбции.
Построение калибровочной
кривой и учет результатов.
Дезинфекция образцов,
планшета, рабочего стола,
инструментария, приборов,
посуды
7.9.4.2. автоматизированный расчет исследование Включение прибора и врач- - 2
проведение процедуры лаборант
ежедневного обслуживания.
Приготовление промывающего фельдшер- - 4
раствора. Введение в лаборант
память прибора номера
образца, ФИО пациента,
название теста. Распечатка
листа загрузки. Загрузка
образца, реагентов
(коньюгат, проявитель,
останавливающий раствор,
антиген, промывающий
раствор). Старт прибора.
По окончании работы
прибора распечатка
результатов анализа.
Проведение процедуры
ежедневного обслуживания
прибора
7.10. определение общего
иммуноглобулина Е методом
иммуноферметного анализа
7.10.1. полуавтоматизированный исследование Отбор образцов и врач- - 3
расчет стандартов и внесение их в лаборант
пробирки или лунки
планшета, на которых фельдшер- - 4
предварительно проводят лаборант
процедуру фиксации,
отмывки, закрепления АТ
(антитело) или АГ
(антиген). (На готовых
тест-системах АГ или АТ
заранее фиксированы в
лунках). Инкубация 30 - 60
мин. (и более) в
термостатируемом плашечном
шейкере. Избыток АТ или АГ
не образовавшихся
комплексов удаляют. Во все
ячейки вносят отмывающий
буфер, затем его удаляют.
Процедуру отмывки проводят
4 - 5-кратно вручную или с
помощью отмывающего
устройства. Готовят
конъюгат. Затем вносят во
все ячейки конъюгат,
меченый ферментом АГ или
АТ. Инкубация в
термостатируемом плашечном
шейкере 30 - 60 мин.
Конъюгат удаляют и
проводят 4-кратное
отмывание планшета или
пробирок. Перед внесением
готовят субстрат для
ферментативной реакции.
Добавляют субстрат во все
лунки планшета. Инкубация
в темноте 20 - 30 мин.
Останавливают реакцию
добавлением стоп-реагента
и проводят
спектрофотометрическое
определение концентрации
продукта ферментативной
реакции. Построение
калибровочной кривой и
учет результатов.
Дезинфекция образцов,
планшета, рабочего стола,
инструментария, приборов,
посуды
7.10.2. автоматизированный расчет исследование Включение прибора и врач- - 2
проведение процедуры лаборант
ежедневного обслуживания.
Приготовление промывающего фельдшер- - 4
раствора. Введение в лаборант
память прибора номера
образца, ФИО пациента,
название теста. Распечатка
листа загрузки. Загрузка
образца, реагентов
(коньюгат, проявитель,
останавливающий раствор,
антиген, промывающий
раствор). Старт прибора.
По окончании работы
прибора распечатка
результатов анализа.
Проведение процедуры
ежедневного обслуживания
прибора
7.11. определение специфического
иммуноглобулина Е
7.11.1. методом иммуноферментного
анализа
7.11.1.1. полуавтоматизированный исследование Подготовка образцов и врач- - 3
расчет внесение стандартов в лаборант
пробирки или планшеты, на
которых фиксируют АТ фельдшер- - 7
(антитело) или АГ лаборант
(антиген). В дисковых
тест-системах в ячейки
раскладывать аллергодиски,
HSA - контрольные диски,
диски для стандартов, для
позитивного и негативного
контролей. Время инкубации
30 - 60 мин. в
термостатируемом плашечном
шейкере. Избыток АТ или АГ
не образовавшихся
комплексов удаляют.
Отмывочным буфером 4 - 5-
кратно отмывают ячейки
планшета (в дисковых тест-
системах - до 9 раз
специальным вошером до 1,0
мл за 1 цикл отмывки).
Затем вносят конъюгат АГ
или АТ, меченый ферментом.
Инкубация на
термостатируемом шейкере
30 - 60 мин. Удаление
конъюгата и 4-кратное
отмывание планшета или
пробирок. Добавление
субстрата во все лунки
планшета. Инкубация 20 -
30 минут. Остановка
реакции добавлением стоп-
реагента. Измерение
концентрации продуктов
ферментативной реакции.
Построение калибровочной
кривой Дезинфекция
образцов, планшета,
рабочего стола,
инструментария, приборов,
посуды
7.11.1.2. автоматизированный расчет исследование Включение прибора и врач- - 2
проведение процедуры лаборант
ежедневного обслуживания.
Приготовление промывающего фельдшер- - 7
раствора. Введение в лаборант
память прибора номера
образца, ФИО пациента,
название теста. Распечатка
листа загрузки. Загрузка
образца, реагентов
(коньюгат, проявитель,
останавливающий раствор,
антиген, промывающий
раствор). Старт прибора.
По окончании работы
прибора распечатка
результатов анализа.
Проведение процедуры
ежедневного обслуживания
прибора
7.12. определение секреторных
иммуноглобулинов
7.12.1. методом радиальной
иммунодиффузии
7.12.1.1. с приготовлением и исследование Растворяют 1,5 г агара в врач- - 6
заливкой агара, 100 мл буфера на водяной лаборант
построением калибровочной бане, охлаждают до 48 °C и
кривой смешивают с АС, подогретой фельдшер- - 2
до той же температуры. лаборант
Наносят пипеткой 2 мл
смеси на предметное
стекло, установленное
строго горизонтально на
подставке, нагретой до
35 - 40 °C. Золь агара,
содержащий АТ,
распределяется по
поверхности предметного
стекла и застывает слоем
толщиной 1 мм. На
предметном стекле в слое
геля вырезают по 8 лунок
(и более) при помощи
отшлифованной стеклянной
трубки, соединенной с
водоструйным насосом. В
каждую из лунок вносят по
2 мкл раствора антигена
(стандартов и образцов).
Реакцию простой радиальной
ИД проводят во влажной
камере 24 - 48 часов.
Препараты высушивают и
окрашивают. К моменту
завершения диффузии
наблюдается прямая
линейная зависимость между
исходной концентрацией АГ
и площадью преципитата.
Построение калибровочной
кривой и проведение
расчетов концентраций
проб. Дезинфекция проб и
рабочего места
7.12.1.2. с использованием готовых исследование В готовые планшеты с врач- - 6
иммунодиффузионных планшет лунками добавляют образцы, лаборант
предварительно
разведенные. Планшеты фельдшер- - 2
помещают во влажную лаборант
камеру. Инкубируют,
высушивают и окрашивают.
Для построения графика
берут логарифм
концентрации АГ и как
функцию от него площадь
преципитата, квадрат
диаметра зоны преципитации
или логарифм диаметра
преципитата. Проводят
количественную оценку
преципитата
7.12.2. методом иммуноферментного
анализа
7.12.2.1. полуавтоматизированный исследование Внесение образцов и врач- - 3
расчет стандартов х в пробирки лаборант
или лунки планшета, на
которых предварительно фельдшер- - 4
проводят процедуру лаборант
фиксации, отмывки,
закрепления АТ (антитело)
или АГ (антиген). (На
готовых тест-системах АГ
или АТ заранее фиксированы
в лунках). Инкубация 30 -
60 мин. (и более) в
термостатируемом плашечном
шейкере. Избыток АТ или АГ
не образовавшихся
комплексов удаляют. Во все
ячейки вносят отмывающий
буфер, затем удаляют его.
Процедуру отмывки проводят
4 - 5-кратно вручную или с
помощью отмывающего
устройства. Готовят
конъюгат. Затем вносят во
все ячейки конъюгат,
меченый ферментом АГ или
АТ. Инкубация в
термостатируемом плашечном
шейкере 30 - 60 мин.
Удаляют конъюгат, проводят
4-кратное отмывание
планшета или пробирок.
Добавляют субстрат во все
лунки планшета. Инкубация
в темноте 20 - 30 мин.
Остановка реакции
добавлением стоп-реагента.
Спектрофотометрическое
определение абсорбции.
Построение калибровочной
кривой и учет результатов.
Дезинфекция образцов,
планшета, рабочего стола,
инструментария, приборов,
посуды
7.12.2.2. автоматизированный расчет исследование Включение прибора и врач- - 2
проведение процедуры лаборант
ежедневного обслуживания.
Приготовление промывающего фельдшер- - 4
раствора. Введение в лаборант
память прибора номера
образца, ФИО пациента,
название теста. Распечатка
листа загрузки. Загрузка
образца, реагентов
(коньюгат, проявитель,
останавливающий раствор,
антиген, промывающий
раствор). Старт прибора.
По окончании работы
прибора распечатка
результатов анализа.
Проведение процедуры
ежедневного обслуживания
прибора
7.13. определение циркулирующих
иммунных комплексов (с
выделением и типированием)
7.13.1. методом радиальной
иммунодиффузии
7.13.1.1. с приготовлением и исследование Растворяют 1,5 г агара в врач- - 3
заливкой агара, 100 мл буфера на водяной лаборант
построением калибровочной бане, охлаждают до 48 °C и
кривой смешивают с АС, подогретой фельдшер- - 7
до той же температуры, в лаборант
соответствии с
инструкцией. Наносят
пипеткой 2 мл смеси на
предметное стекло,
установленное строго
горизонтально на
подставке, нагретой до
35 - 40 °C. Золь агара,
содержащий АТ,
распределяется по
поверхности предметного
стекла и застывает слоем
толщиной 1 мм. На
предметном стекле в слое
геля вырезают по 8 лунок
при помощи отшлифованной
стеклянной трубки,
соединенной с водоструйным
насосом. В каждую из лунок
вносят по 2 мкл раствора
антигена. Реакцию простой
радиальной ИД проводят во
влажной камере. Препараты
высушивают и окрашивают. К
моменту завершения
диффузии наблюдается
прямая линейная
зависимость между исходной
концентрацией АГ и
площадью преципитата.
Построение калибровочной
кривой
7.13.1.2. с использованием готовых исследование Внесение в лунки планшета врач- - 3
иммунодиффузионных планшет физраствора, раствора ПЭГ, лаборант
сыворотки крови. Инкубация
при комнатной температуре. фельдшер- - 7
Учет результата на лаборант
спектрофотометре. Расчет
окончательного результата.
7.13.2. методом иммуноферментного
анализа
7.13.2.1. полуавтоматизированный исследование Образцы добавляют в врач- - 3
расчет пробирки или планшеты, на лаборант
которых фиксируют АТ
(антитело) или АГ фельдшер- - 4
(антиген). Время инкубации лаборант
30 - 60 мин. Избыток не
образовавшихся комплексов
удаляют 4 - 5-кратным
отмыванием. Затем вносят
меченый ферментом АГ или
АТ. Инкубация 30 - 60 мин.
4-кратное отмывание
планшета или пробирок.
Добавляют субстрат для
фермента, останавливают
реакцию по истечении
определенного времени и
проводят колориметрическое
определение продуктов
ферментативной реакции.
Построение калибровочной
кривой
7.13.2.2. автоматизированный расчет исследование Образцы добавляют в врач- - 2
пробирки или планшеты, на лаборант
которых фиксируют АТ
(антитело) или АГ фельдшер- - 4
(антиген). Время инкубации лаборант
30 - 60 мин. Избыток не
образовавшихся комплексов
удаляют 4 - 5-кратным
отмыванием. Затем вносят
меченый ферментом АГ или
АТ. Инкубация 30 - 60
мин. 4-кратное отмывание
планшета или пробирок.
Добавляют субстрат для
фермента, останавливают
реакцию по истечении
определенного времени и
проводят колориметрическое
определение продуктов
ферментативной реакции
7.14. определение фагоцитарной
активности лейкоцитов
7.14.1. латекс-тестом исследование Внесение в лунку планшета врач- - 6
лейкоцитарной взвеси, лаборант
добавление взвеси частиц
латекса, перемешивание, фельдшер- - 3
инкубация в термостате. лаборант
Центрифугирование.
Удаление надосадочной
жидкости, добавление
дистиллированной воды,
перемешивание.
Приготовление препарата на
предметном стекле.
Высушивание, фиксация,
промывание, окрашивание
препарата. Учет результата
под иммерсионной системой
микроскопа
7.14.2. тестом с нитросиним исследование В две агглютинационные врач- - 11
тетразолием пробирки вносят по 0,05 мл лаборант
капиллярной крови, затем в
одну из них добавляют фельдшер- - 16
0,025 мл изотонического лаборант
фосфатного буфера, в
другую - 0,025 мл
суспензии зимозана. После
этого в пробирки вносят по
0,025 мл 0,15%-го раствора
НСТ. Содержимое пробирок
осторожно перемешивают и
инкубируют на водяной бане
при температуре 37 °C 30
мин, перемешивая каждые 10
мин. После инкубации,
перемешивают, наносят по
одной капле на предметные
стекла, делают мазки и
высушивают на воздухе.
Готовые мазки фиксируют
метанолом 10 мин.,
высушивают, докрашивают
2%-м водным раствором
метилового зеленого 20
мин., промывают,
высушивают и
микроскопируют
7.14.3. прямым визуальным методом исследование Приготовление взвеси врач- - 44
определения фагоцитоза пекарских дрожжей в лаборант
физиологическом растворе.
Кипятят на водяной бане в фельдшер- - 28
течение часа. Отмывают лаборант
физиологическим раствором,
центрифугируют. Из осадка
готовят рабочий раствор
взвеси. Внесение в лунку
планшета лейкоцитарной
взвеси, добавление взвеси
пекарских дрожжей,
перемешивание, инкубация в
термостате.
Центрифугирование.
Удаление надосадочной
жидкости, добавление
дистиллированной воды,
перемешивание.
Приготовление препарата на
предметном стекле.
Высушивание, фиксация,
промывание, окрашивание
препарата. Учет результата
под иммерсионной системой
микроскопа. Дезинфекция
образцов биоматериала,
посуды, рабочего места
7.14.4. спектрофотометрическим исследование Выделение нейтрофилов в врач- - 3
методом градиенте плотности. лаборант
Подсчет нейтрофилов в
камере Горяева. Внесение в фельдшер- - 4
лунку планшета лаборант
нейтрофильной взвеси и
диагностикума. Инкубация
30 - 60 мин. Добавление
реагента останавливающего
реакцию. Измерение
продукции реакции
7.14.5. лизосомально-катионным исследование Подготовка реагентов для врач- - 11
тестом постановки исследования. лаборант
Приготовление препарата на
предметном стекле. фельдшер- - 16
Высушивание. Проведение лаборант
процедуры фиксации,
окраска препарата. Учет
результата под
иммерсионной системой
микроскопа. Расчет
среднего цитохимического
коэффициента (СЦК)
7.15. определение
комплементарной активности
сыворотки крови
7.15.1. методом титрования по 50%- исследование Приготовление гемсистемы. врач- - 15
му гемолизу Маркировка и расстановка лаборант
пробирок, разливка буфера
и внесение исследуемых
сывороток. Титрование
исследуемых сывороток в
ряду пробирок (10
пробирок). Добавление
гемолитической системы во
все ряды. Инкубация в
термостате 45 мин.
Встряхивание каждые 15
мин. Помещают пробы в
холодильник на 10 мин.
Центрифугирование.
Визуальный учет
результатов. Дезинфекция
посуды и проб, рабочего
места, приборов
7.15.2. турбидиметрическим методом исследование В пробирке смешивают врач- - 2
сыворотку и реактив 1, лаборант
тщательно перемешивают
стеклянной палочкой. фельдшер- 2
Инкубируют 10 мин. при лаборант
комнатной температуре.
Центрифугируют 15 мин.
Отбирают центрифугат, и к
нему добавляют реактив 2.
Инкубируют 15 мин.
Измеряют оптическую
плотность на
фотоэлектроколориметре.
Результаты сравнивают с
результатом контрольной
пробы. Разница их значений
отражает концентрацию
определяемого вещества
7.16. определение индивидуальных
белков сыворотки крови
(СРБ, С3, С4, С5, С1-
ингибитор и т.д.)
7.16.1. методом радиальной
иммунодиффузии (РИД)
7.16.1.1. с приготовлением и исследование Растворяют 1,5 г агара в врач- - 6
заливкой агара, 100 мл буфера на водяной лаборант
построением калибровочной бане, охлаждают до 48 °C и
кривой смешивают с АС, подогретой фельдшер- - 2
до той же температуры, в лаборант
соответствии с
инструкцией. Наносят
пипеткой 2 мл смеси на
предметное стекло,
установленное строго
горизонтально на
подставке, нагретой до
35 - 40 °C. Золь агара,
содержащий АТ,
распределяется по
поверхности предметного
стекла и застывает слоем
толщиной 1 мм. На
предметном стекле в слое
геля вырезают по 8 лунок
(и более) при помощи
отшлифованной стеклянной
трубки, соединенной с
водоструйным насосом. В
каждую из лунок вносят по
2 мкл раствора антигена
(стандартов и образцов).
Реакцию простой радиальной
ИД проводят во влажной
камере 24 - 48 часов.
Препараты высушивают и
окрашивают. К моменту
завершения диффузии
наблюдается прямая
линейная зависимость между
исходной концентрацией АГ
и площадью преципитата.
Проводят измерение колец
преципитации стандартов и
исследуемых образцов.
Построение калибровочной
кривой и проведение
расчетов концентраций
проб. Дезинфекция проб и
рабочего места
7.16.1.2. с использованием готовых исследование В готовые планшеты с врач- - 6
иммунодиффузионных планшет лунками добавляют образцы, лаборант
предварительно
разведенные. Планшеты фельдшер- - 2
помещают во влажную лаборант
камеру. Инкубируют,
высушивают и окрашивают.
Для построения графика
берут логарифм
концентрации АГ и как
функцию от него площадь
преципитата, квадрат
диаметра зоны преципитации
или логарифм диаметра
преципитата.
Количественная оценка
преципитата
7.16.2. турбидиметрическим методом исследование В пробирке смешивают врач- - 2
сыворотку и реактив 1, лаборант
тщательно перемешивают
стеклянной палочкой. фельдшер- - 2
Инкубируют 10 мин. при лаборант
комнатной температуре.
Центрифугируют 15 мин.
Отбирают центрифугат, и к
нему добавляют реактив 2.
Инкубируют 15 мин.
Измеряют оптическую
плотность на
фотоэлектроколориметре.
Результаты сравнивают с
результатом контрольной
пробы. Разница их значений
отражает концентрацию
определяемого вещества
7.17. определение активности
анти-0-стрептолизина в
сыворотке крови
7.17.1. методом пассивного исследование Готовят 5%-ю взвесь врач- - 7
гемолиза эритроцитов. Исследуемую лаборант
разведенную сыворотку
титруют в пробирках (10 фельдшер- - 7
пробирок), добавляют лаборант
диагностикум. Инкубируют
15 мин. при 37°, добавляют
5%-ю взвесь эритроцитов,
инкубируют при комнатной
температуре 60 мин.
Учитывают результат
визуально по реакции
пассивного гемолиза
7.17.2. латекс-тестом исследование Исследуемую сыворотку фельдшер- - 3
предварительно разводят лаборант
буфером. Разведенную
сыворотку наносят на
предметное стекло,
добавляют диагностикум
(латекс), тщательно
перемешивают, инкубируют 3
мин., покачивают.
Результат учитывают через
5 мин. по агглютинации
7.18. определение активности исследование Готовят ряд разведений врач- - 4,5
антигиалуронидазы в сыворотки (3 пробирки). лаборант
сыворотке крови методом с Добавляют препарат
ферментом гиалуронидазой стрептококковой фельдшер- - 8
гиалуронидазы, титруют лаборант
гиалуроновой кислотой.
Проводят визуальный учет
результата
7.19. определение аутоантител (к
тиреоглобулину, к
микросомальной фракции
тиреоцитов, к ДНК, к
гистоновым белкам, к
коллагенам, к
экстрагируемым ядерным
антигенам, к кардиолипину,
к миелину, к
фосфатидилсерину, к
антигенам спермы, к
аутоантигенам),
антинуклеарного фактора и
других
7.19.1. реакцией прямой исследование Исследуемые сыворотки врач- - 3
гемагглютинации инактивируем 30 мин. при лаборант
температуре 56 °C. Для
постановки реакции фельдшер- - 2
необходимы 4 пробирки. лаборант
Одна контрольная, в три
добавляем исследуемую
сыворотку и комплемент.
Инкубируем 45 мин. при
температуре
37 °C. Добавляем
гемолитическую систему и
инкубируем 45 мин. при
температуре 37 °C. Учет
результата проводим
визуально по реакции
пассивной гемагглютинации
7.19.2. методом иммуноферментного
анализа
7.19.2.1. полуавтоматизированный исследование Внесение образцов и врач- - 3
расчет стандартов в пробирки или лаборант
лунки планшета, на которых
предварительно проводят фельдшер- - 4
процедуру фиксации, лаборант
отмывки, закрепления АТ
(антитело) или АГ
(антиген). (На готовых
тест-системах АГ или АТ
заранее фиксированы в
лунках). Инкубация 30 - 60
мин. (и более) в
термостатируемом плашечном
шейкере. Избыток АТ или АГ
не образовавшихся
комплексов удаляют. Во все
ячейки вносят отмывающим
буфер, затем удаляют его.
Процедуру отмывки проводят
4 - 5-кратно вручную или с
помощью отмывающего
устройства. Готовят
конъюгат. Затем вносят во
все ячейки конъюгат,
меченый ферментом АГ или
АТ. Инкубация в
термостатируемом плашечном
шейкере 30 - 60 мин.
Удаляют конъюгат, проводят
4-кратное отмывание
планшета или пробирок.
Добавляют субстрат во все
лунки планшета. Инкубация
в темноте 20 - 30 мин.
Остановка реакции
добавлением стоп-реагента.
Спектрофотометрическое
определение абсорбции.
Построение калибровочной
кривой и учет результатов.
Дезинфекция образцов,
планшета, рабочего стола,
инструментария, приборов,
посуды
7.19.2.2. автоматизированный расчет исследование Включение прибора и врач- - 2
проведение процедуры лаборант
ежедневного обслуживания.
Приготовление промывающего фельдшер- - 4
раствора. Введение в лаборант
память прибора номера
образца, ФИО пациента,
название теста. Распечатка
листа загрузки. Загрузка
образца, реагентов
(коньюгат, проявитель,
останавливающий раствор,
антиген, промывающий
раствор). Старт прибора.
По окончании работы
прибора распечатка
результата анализа.
Проведение процедуры
ежедневного обслуживания
прибора
7.19.3. методом непрямой исследование Приготовление буферного врач- - 20
иммунофлюоресценции раствора. Разведение лаборант
сыворотки буферным
раствором. Раскапывание
контролей и сыворотки в
лунки специального стекла.
Инкубация при комнатной
температуре 20 мин.
Промывание буфером
двукратное. Инкубация в
буфере 10 мин. Высушивание
стекла. Раскапывание AFF
FITC. Инкубация 20 мин.
Промывание двукратное.
Окрашивание препарата 10
мин. Промывание.
Высушивание. Добавление в
лунки стекла Maunting
Medium. Микроскопия под
люминесцентным микроскопом
7.19.4. определение антител к
туберкулезным антигенам
7.19.4.1. реакцией прямой исследование 1. Подготовительная фельдшер- 20 5
гемагглютинации работа: подготовка панели. лаборант
2. Проведение
исследования: инактивация
и разведение стандартных и
исследуемых сывороток и
эритроцитарного
диагностикума, внесение в
лунки панели, инкубация в
термостате, учет
результатов
7.19.4.2. Определение суммарных исследование 1. Подготовительная фельдшер- 20 7
антител (Ig G, A, M) к работа: подготовка лаборант
антигенам M. tuberculosis планшета.
методом иммуноферментного 2. Проведение
анализа с исследования: разведение
полуавтоматизированным стандартных и исследуемых
расчетом сывороток, внесение в
лунки планшета с
иммобилизированным
антигеном, инкубация в
термостате, отмывка
планшет, встряхивание,
внесение конъюгата,
инкубация в термостате,
отмывка встряхиванием,
внесение субстратного
раствора (хромогена),
проявителя, стоп-реагента.
Результаты учитывают
фотометрически. Расчет
результатов
7.20. определение антител к исследование Исследуемую сыворотку фельдшер- - 2
нативной ДНК латекс-тестом наносят на предметное лаборант
стекло, добавляют
диагностикум (латекс),
тщательно перемешивают,
инкубируют 3 мин.,
покачивают. Результат
учитывают через 5 мин. по
реакции агглютинации
7.21. определение ревматоидного
фактора в сыворотке крови
7.21.1. реакция гемагглютинации исследование Приготовление 3%-й взвеси врач- - 8
(Ваалер-Розе) эритроцитов барана лаборант
Страницы: | Стр. 1 | Стр. 2 | Стр. 3 | Стр. 4 | Стр. 5 | Стр. 6 | Стр. 7 | Стр. 8 | Стр. 9 | Стр. 10 | Стр. 11 | Стр. 12 | Стр. 13 | Стр. 14 | Стр. 15 | Стр. 16 | Стр. 17 | Стр. 18 | Стр. 19 | Стр. 20 | |
Новости законодательства
Новости Спецпроекта "Тюрьма"
Новости сайта
Новости Беларуси
Полезные ресурсы
Счетчики
|
