Стр. 5
Страницы:
Стр.1 |
Стр.2 |
Стр.3 |
Стр.4 |
Стр.5
растворяют в 900 мл Н2О, доводят сухим трисом (10 г) до рН 8,3 и
общий объем - до 1 л.
5. Лизирующий буфер: 10 мл буфера для фокусирующего геля (рН
6,8), 5 мл - b-меркаптоэтанола, 2 г ДСН и 5 мл Н2О. Лизирующий буфер
добавляют к пробе в количестве 1/4 от объема образца.
6. Маркерная краска: 200 мг "бромфенолового голубого"
растворяют в буфере для образца, добавляют 50 мг глицерина, объем
доводят до 100 мл.
7. Буфер для образца: 0,84 г трио растворяют в 90 мл Н2О,
доводят концентрированной НСl до рН 6,8 и Н2О до 100 мл.
8. Разделительный гель. Для приготовления 10% разделительного
геля смешивают 10 мл раствора мономеров, 20 мл буфера для
разделительного геля (для приготовления 12% разделительного геля
берут соответственно 12 мл и 18 мл). Добавляют 0,015 мг персульфата
аммония и 0,075 мл ТЕМЕD в разведении 1/10. Смесь перемешивают и
заливают в пластину для электрофореза. Сверху осторожно наслаивают 1
мл дистиллированной воды и оставляют при комнатной температуре. О
завершении полимеризации геля судят по появлению четкого раздела
между гелем и водой. После завершения полимеризации воду сливают и
поверхность геля осторожно осушают фильтровальной бумагой.
9. Фокусирующий гель, 5%. Смешивают 1,5 мл раствора мономеров и
9 мл буфера для фокусирующего геля, добавляют 6 мг персульфата
аммония и 0,05 мл TEMED в разведении 1/10.
10. Буфера для переноса:
буфер А: 0,3 М трис рН 10,4;
буфер Б: 25 мМ трис рН 10,4;
буфер В: 40 мМ аминокапроновая кислота, 25 мМ трис рН 9,4.
11. Трис-буфер рН 7,4 (ТБ), 10-кратный сток-раствор: 6,05 г
трис, 0,5 г азида натрия и 45 г хлористого натрия. Растворяют в 400
мл H2О, доводят рН до 7,4 концентрированной НСl. Доводят объем
буфера до 500 мл.
12. Промывочный буфер. Смешивают 10 мл 10-кратного
сток-раствора ТБ и 90 мл H2О. Добавляют 50 мкл Твин-20,
перемешивают.
13. Блокирующий раствор: 1 г БСА растворяют в 50 мл H2О,
добавляют эмбриональную сыворотку 10 мл и 10 мл 10-кратного ТБ.
Объем доводят до 100 мл H2О, перемешивают.
14. Раствор субстрата: 10 мл 10-кратного ТБ и 90 мл H2О. Вносят
30 мг бензидина, смесь нагревают на водяной бане до полного
растворения диаминобензидина, охлаждают до комнатной температуры и
добавляют 0,1 мл 30% H2О2. Раствор субстрата готовят непосредственно
перед использованием.
Приложение 18
к Инструкции по диагностике
губкообразной энцефалопатии
крупного рогатого скота
Негнойный энцефалит
***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ
Диффузная инфильтрация круглоклеточными элементами нейроглии,
сглаживание структуры мозга, вакуолизация отсутствует
(окраска гематоксилинэозином, 300х)
Приложение 19
к Инструкции по диагностике
губкообразной энцефалопатии
крупного рогатого скота
Негнойный энцефалит
***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ
Диффузная инфильтрация круглоклеточными элементами нейроглии,
сглаживание структуры мозга, вакуолизация отсутствует
(окраска гематоксилинэозином, 600х)
Приложение 20
к Инструкции по диагностике
губкообразной энцефалопатии
крупного рогатого скота
Бешенство
***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ
Наличие в аммоновом рогу патогномоничных оксифильных (красных)
округлых телец Бабеша-Негри (окраска по Муромцеву, 600х)
Приложение 21
к Инструкции по диагностике
губкообразной энцефалопатии
крупного рогатого скота
Гнойный энцефалит при листериозе
***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ
Цитокариопикноз и лизис нейронов, диффузная инфильтрация
нейроглии лимфоидными и частично нейтрофильными элементами
(окраска гематоксилинэозином, 300х)
Приложение 22
к Инструкции по диагностике
губкообразной энцефалопатии
крупного рогатого скота
Гнойный энцефалит при листериозе
***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ
Цитокариопикноз и лизис нейронов, диффузная инфильтрация
нейроглии лимфоидными и частично нейтрофильными элементами
(окраска гематоксилинэозином, 300х)
Приложение 23
к Инструкции по диагностике
губкообразной энцефалопатии
крупного рогатого скота
Аденоматоз овец
***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ
Метаплазия альвеолярного эпителия в виде онкоподобных аденом на
фоне расплавления межальвеолярных перегородок и образования
эмфизематозных полостей (окраска гематоксилинэозином, 300х)
Приложение 24
к Инструкции по диагностике
губкообразной энцефалопатии
крупного рогатого скота
Висна овец
***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ
Патогномоничный периваскулярный инфильтрат крупноклеточных
элементов в стволовой части продолговатого мозга
(окраска гематоксилинэозином, 300х)
Приложение 25
к Инструкции по диагностике
губкообразной энцефалопатии
крупного рогатого скота
Скрепи овец
***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ
Кариопикноз, каогуляция и пониженная оксифилия цитоплазмы нейронов
(окраска гематоксилинэозином, 300х)
Приложение 26
к Инструкции по диагностике
губкообразной энцефалопатии
крупного рогатого скота
Скрепи овец
***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ
Цитокариолизис нейронов (окраска гематоксилинэозином, 300х)
Приложение 27
к Инструкции по диагностике
губкообразной энцефалопатии
крупного рогатого скота
Скрепи овец
***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ
Хроматолизис ядра и вакуолизация цитоплазмы нейронов
(окраска гематоксилинэозином, 300х)
Приложение 28
к Инструкции по диагностике
губкообразной энцефалопатии
крупного рогатого скота
Скрепи овец
***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ
Лизис цитоплазмы и оттеснение остатков ядра к периферии нейрона.
Характерный патогномоничный признак - перстневидный нейрон
(окраска гематоксилинэозином, 300х)
Приложение 29
к Инструкции по диагностике
губкообразной энцефалопатии
крупного рогатого скота
Меди овец
***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ
Пролиферация круглоклеточных элементов в интерситициальной ткани
легких, перибронхит, расплавление межальвеолярных перегородок и
образование эмфиземподобных полостей
(окраска гематоксилинэозином, 300х)
Страницы:
Стр.1 |
Стр.2 |
Стр.3 |
Стр.4 |
Стр.5
|
